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游离核酸提取

游离DNA（Circulating free DNA, cfDNA)，是一种在细胞外呈现游离状态且无细胞状态的的DNA，广泛存在于血浆、血清、尿液、粪便以及脑脊液中。研究应用较多的主要包含胎儿游离DNA（cell free fetal DNA，cffDNA）和肿瘤游离DNA（cell free tumor DNA，ctDNA），两者分别在孕妇和肿瘤患者体内的发现。研究表明，在诸如自身免疫疾病、癌症等病理条件下，血液中cfDNA的数量增加。

健康个体血浆中cfDNA的平均浓度范围为0至100 ng/mL，平均浓度为30 ng/mL，而癌症患者血浆中的cfDNA浓度明显升高且浓度与癌症的分期以及肿瘤的大小往往呈正相关。且ctDNA具有肿瘤组织细胞DNA一致的基因突变类型，因此通过肿瘤游离DNA基因可作为肿瘤无创检测的新一代标志物。除此之外，术后随访期间ctDNA的浓度变化与术后效果密切相关，治疗后ctDNA浓度的急剧降低意味着较好的预后，若浓度增加通常则表示发生耐药性突变或者治疗失败。但是现阶段使用cfDNA对基因进行检测仍存在一定的挑战性，首先，如上所述血液中cfDNA含量极低，因此往往需要从几毫升的外周血中进行提取富集，其次，手工操作整体时间较长。

为提升游离核酸提取效果及效率，奥盛推出从样品提取、浓度检测以及自动化建库的全流程方案。Allsheng®磁珠法游离DNA（cfDNA）提取试剂盒搭配多款自动化提取仪，最大可实现4mL样品的游离核酸自动化提取需求。

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游离核酸提取

游离核酸提取试剂盒

仪器特点

· 可处理200uL至5mL样品，满足不同体积样品提取需求
· 操作简便，可同时用于手工提取与自动化提取
· 成熟方案，得率稳定，无明显片段丢失

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核酸自动化提取

仪器特点

· 全流程自动化设计，可实现试剂转移、样本转移、核酸提取以及PCR体系构建
· 大样本体积处理，最大处理体积10mL（最大样品量5mL）
· 快速精准的液体转移，双通道移液设计，50-5000uL一把，1-200uL一把
· 简单易学的操作软件，图形用户界面，无需复杂操作即可完成程序编辑
· 特殊设计试剂盒可单独封装，可对单一样本进行核酸提取纯化
· 开放式软件设计，可适配各类游离核酸提取试剂盒

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核酸浓度测定

仪器特点

· Fluo-200/800荧光计可分别同时检测1个/8个样品；
· 精准定量，仅需1-20ul即可获得精确的样品浓度；
· 灵敏度高，最低检测极限可达1pg/ul（dsDNA）；
· 开放式设计，适配各类荧光计检测试剂

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游离核酸提取试剂盒
核酸自动化提取
核酸浓度测定

游离核酸提取试剂盒

生物分析仪表征抽提产物各片段分布

将1ul DNA ladder原始样品与1ul 回收的DNA样品同时进行片段分析，结果显示两者片段分布高度一致，且回收效率在90%以上。

不同试剂盒肿瘤患者血浆提取结果

分别使用Allsheng®、进口试剂盒T以及国产试剂盒A对两个1ml肿瘤患者血浆样品进行提取，最后磁珠于50ul洗脱液洗脱，使用Fluo-100荧光计进行浓度测试。
核酸自动化提取
核酸浓度测定

不同体积肿瘤患者血浆提取结果

分别使用手工法与自动化仪器对0.5ml、1ml以及4ml肿瘤患者血浆进行提取，采用50ul洗脱体积。结果显示3种体积下，两种提取方法得率无明显差异（a），并且片段大小分布大致相同（b、c、d）。